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超純水(UPW)的制備和滅菌

2022-12-30 13:27 來源:上海遠慕生物試劑
儀器、耗材
有刻度的玻璃硼硅酸鹽或消毒的塑料螺口瓶子
螺旋蓋
試紙
膠帶標簽
純水設備
消毒鍋
日記本

實驗步驟
1.在瓶子上標明日期、容量和批號。

2.經過過夜循環后的第二天早晨,從純水器中放出約50ml水,分別用相應的儀器測定傳導率(或電阻)和總有機碳(TOC)含量,記錄在日記本上。

3.如果水的質量達到限定的標準(在25°C時,水的電阻≥10MΩ/cm,TOC≤10μg/L),就直接收集至標注好的瓶子內。

4.灌至一定的體積,例如,如果用于稀釋10倍濃縮培養基,就分裝成430~450ml,如果要用于滅菌,就留出10%的空間。

5.將滅菌指示器放人一個瓶子(消毒之后檢査,而后丟棄這個瓶子)。

6.用螺口蓋將瓶子密封,如果使用堿性玻璃,即有瓶子可能破裂,就將蓋子松開。

7.將瓶子擺放在消毒鍋內,放有消毒指示器的瓶子放置在中間。

8.關上消毒鍋,檢査設置:121°C,100kPa(15lb/in2),以后真空之后(postvacdeselected)運行20min。

9.開啟滅菌程序。

10.在循環完成之后,檢査打印出的記錄,確認執行的是正確的滅菌過程,記錄在本上。

11.放置,冷卻至50°C以下。

12.打開消毒鍋取瓶子,如果在高壓滅菌過程中瓶蓋松了,就在瓶子的溫度降到室溫時將蓋子擰緊。檢查滅菌指示器,確認滅菌條件已經達到,記錄在日記本中。

13.將瓶子于室溫短期存放。

14.根據需要補充至培養室備用,通過檢查滅菌指示膠帶來確認瓶子是否已經經過滅菌處理。

注意事項

如果消毒過程中瓶蓋被打開了,在瓶子仍然是熱的時候將蓋子擰上可能會使某些瓶蓋內的襯里在瓶子冷卻或瓶內容物收縮時落入瓶子。同樣,第一次打開瓶子時,空氣會迅速地進入瓶子,這會引起污染。因此,在滅菌過程中被打開的瓶子,應使其在無菌環境中冷卻至室溫,例如在擰蓋之前將其保持在消毒鍋內或放在層流罩內。
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